Calcolatore di Concentrazione di Proteine

Categoria: Biologia
- April 04, 2025
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I valori tipici variano da 0.5 a 2.0
Le cuvette standard hanno una lunghezza del cammino di 1 cm
Se il campione è stato diluito prima della misurazione (es. 5 = diluizione 1:5)

La concentrazione di proteine utilizzando l'assorbanza a 280 nm (A280) è determinata utilizzando la Legge di Beer-Lambert:

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

dove:

  • \( C \) = Concentrazione di proteine (mg/mL)
  • \( A \) = Assorbanza a 280 nm
  • \( \epsilon \) = Coefficiente di estinzione (L·g⁻¹·cm⁻¹)
  • \( l \) = Lunghezza del cammino della cuvetta (cm)

Che cos'è il Calcolatore di Concentrazione di Proteine?

Il Calcolatore di Concentrazione di Proteine aiuta a determinare la concentrazione di proteine utilizzando diversi metodi, tra cui:

  • Assorbanza a 280 nm (A280): Un metodo rapido e non distruttivo basato sugli aminoacidi aromatici.
  • Assay di Bradford: Un metodo colorimetrico che utilizza il legame con coloranti.
  • Assay BCA (Acido Bicinchonico): Un metodo che si basa sulla riduzione del rame e sulla rilevazione colorimetrica.
  • Assay di Lowry: Un approccio ben consolidato che utilizza interazioni proteina-rame.

Come Utilizzare il Calcolatore

Segui questi passaggi per calcolare la concentrazione di proteine:

  • Seleziona il metodo di misurazione (A280, Bradford, BCA o Lowry).
  • Inserisci i valori richiesti come assorbanza, fattore di diluizione e coefficiente di estinzione (se necessario).
  • Se utilizzi un metodo di curva standard (Bradford, BCA o Lowry), inserisci i parametri della curva.
  • Clicca sul pulsante "Calcola" per ottenere il risultato della concentrazione.

Vantaggi dell'Utilizzo del Calcolatore

  • Risparmia tempo automatizzando i calcoli di concentrazione.
  • Supporta più metodi di misurazione per flessibilità.
  • Include un calcolatore di diluizione per preparare concentrazioni specifiche.
  • Riduce l'errore umano nei calcoli manuali.

Domande Frequenti

1. Quanto è preciso il metodo di Assorbanza (A280)?

Il metodo A280 è generalmente preciso per proteine pure ma può essere influenzato da contaminanti come gli acidi nucleici.

2. Posso usare l'Assay di Bradford per tutte le proteine?

L'Assay di Bradford funziona bene per la maggior parte delle proteine ma può dare risultati variabili a seconda della composizione proteica.

3. Qual è il vantaggio dell'Assay BCA?

Il metodo BCA è più compatibile con i detergenti e ha un intervallo lineare più ampio rispetto a Bradford.

4. Come scelgo il corretto coefficiente di estinzione per A280?

Utilizza valori pubblicati per proteine conosciute, oppure calcola il coefficiente di estinzione in base alla composizione degli aminoacidi.

5. Perché ho bisogno di un fattore di diluizione?

Se il tuo campione è diluito prima della misurazione, devi moltiplicare la concentrazione calcolata per il fattore di diluizione per ottenere la corretta concentrazione finale.